RESUMO
BACKGROUND: Polycystic ovary syndrome (PCOS) is associated with metabolic disturbances which include impaired insulin signalling and glucose metabolism in ovarian follicles. The oocyte is metabolically dependent upon its follicle environment during development, but it is unclear whether PCOS or polycystic ovarian (PCO) morphology alone affect oocyte metabolism and energy-demanding processes such as meiosis. METHODS: Immature human oocytes were donated by PCOS (n = 14), PCO (n = 14) and control (n = 46) patients attending the assisted conception programme at Leeds Teaching Hospitals NHS Trust. Oocytes were cultured individually and carbohydrate metabolism was assessed during overnight in vitro maturation (IVM). Meiotic status was assessed and oocyte intracellular nicotinamide adenine dinucleotide phosphate (NAD(P)H) content and mitochondria activity were measured prior to karyotype analysis by multifluor in situ hybridization. RESULTS: Patient aetiology had no significant effect on oocyte maturation potential or incidence of numerical chromosome abnormalities (44%), although PCOS and PCO oocytes were more likely to suffer predivision. Group G chromosomes were most likely to be involved in non-disjunction and predivision. PCOS was associated with increased glucose consumption (2.06 +/- 0.43 and 0.54 +/- 0.12 pmol/h for PCOS and control oocytes, respectively) and increased pyruvate consumption (18.4 +/- 1.2 and 13.9 +/- 0.9 pmol/h for PCOS and control oocytes, respectively) during IVM. Prior prescription of metformin significantly attenuated pyruvate consumption by maturing oocytes (8.5 +/- 1.8 pmol/h) from PCOS patients. Oocytes from PCO patients had intermediate metabolism profiles. Higher pyruvate turnover was associated with abnormal oocyte karyotypes (13.4 +/- 1.9 and 19.9 +/- 2.1 pmol/h for normal versus abnormal oocytes, respectively). Similarly, oocyte NAD(P)H content was 1.35-fold higher in abnormal oocytes. CONCLUSIONS: The chromosomal constitution of in vitro matured oocytes from PCOS is similar to that of controls, but aspects of oocyte metabolism are perturbed by PCOS. Elevated pyruvate consumption was associated with abnormal oocyte karyotype.
Assuntos
Aberrações Cromossômicas/efeitos dos fármacos , Oócitos/efeitos dos fármacos , Oócitos/metabolismo , Indução da Ovulação/efeitos adversos , Síndrome do Ovário Policístico/genética , Síndrome do Ovário Policístico/metabolismo , Adulto , Metabolismo dos Carboidratos/efeitos dos fármacos , Metabolismo dos Carboidratos/genética , Diferenciação Celular , Células Cultivadas , Segregação de Cromossomos/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 21-22 e Y/efeitos dos fármacos , Feminino , Humanos , Hipoglicemiantes/farmacologia , Meiose/efeitos dos fármacos , Metformina/farmacologia , Mitocôndrias/efeitos dos fármacos , Mitocôndrias/metabolismo , NAD/metabolismo , NADP/metabolismo , Cistos Ovarianos/genética , Cistos Ovarianos/metabolismo , Cariotipagem Espectral , Injeções de Esperma Intracitoplásmicas , Adulto JovemAssuntos
Cromossomos/efeitos dos fármacos , Imipramina/farmacologia , Lisina/metabolismo , Substâncias Macromoleculares/metabolismo , Ligação Proteica , Sítios de Ligação , Células Cultivadas/metabolismo , Cromossomos Humanos 1-3/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 13-15/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 16-18/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 19-20/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 21-22 e Y/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 4-5/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 6-12 e X/efeitos dos fármacos , Humanos , Técnicas In Vitro , Marcação por Isótopo , Cariotipagem , Linfócitos/metabolismo , Propriedades de Superfície , Fatores de Tempo , TrítioAssuntos
Cromátides/efeitos dos fármacos , Aberrações Cromossômicas/efeitos dos fármacos , Isoniazida/farmacologia , Cromossomos Humanos 1-3/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 13-15/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 16-18/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 19-20/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 21-22 e Y/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 4-5/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 6-12 e X/efeitos dos fármacos , Humanos , Cromossomos Sexuais/efeitos dos fármacosAssuntos
Bromodesoxiuridina/farmacologia , Cromossomos/efeitos dos fármacos , Hidroxilaminas/farmacologia , Mitomicinas/farmacologia , Análise de Variância , Cromossomos Humanos 1-3/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 13-15/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 16-18/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 19-20/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 21-22 e Y/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 4-5/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 6-12 e X/efeitos dos fármacos , Constrição , Feminino , Humanos , Leucócitos/citologia , Leucócitos/efeitos dos fármacos , Masculino , Métodos , Cromossomos Sexuais/efeitos dos fármacos , Fatores de TempoAssuntos
Bromodesoxiuridina/farmacologia , Cromossomos/efeitos dos fármacos , Autorradiografia , Aberrações Cromossômicas , Cromossomos Humanos 13-15/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 21-22 e Y/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 4-5/efeitos dos fármacos , Técnicas de Cultura , Feminino , Humanos , Leucócitos , Masculino , Aberrações dos Cromossomos Sexuais , Cromossomos Sexuais/efeitos dos fármacos , TrissomiaAssuntos
Aberrações Cromossômicas/efeitos dos fármacos , Ciclofosfamida/farmacologia , Cromossomos Humanos 1-3/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 13-15/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 16-18/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 19-20/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 21-22 e Y/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 4-5/efeitos dos fármacos , Cromossomos Humanos 6-12 e X/efeitos dos fármacos , Ciclofosfamida/uso terapêutico , Feminino , Humanos , Neoplasias/tratamento farmacológico , Cromossomos Sexuais/efeitos dos fármacosRESUMO
(3)H-actinomycin D, a guanine-binding agent, labels fixed human chromosomes nonrandomly. Actinomycin D added in G2 inhibits secondary constrictions and breaks chromosomes. There is some tendency for label to be concentrated at the ends of chromosomes and near the centromere. Labeling with (3)H-thymidine in the late stage of DNA synthesis shows a different pattern and in general lacks the telomeric concentrations. The sites of actinomycin D-induced breaks do not show good correspondence with the sites of actinomycin D label.
